歡迎訪問天津睿創(chuàng)生物科技有限公司
服務熱線：17765108483
|
| 產(chǎn)地 | 上海 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 睿創(chuàng)生物 |
| 貨號 | RC-E110923A |
| 用途 | 科研 |
| 檢測方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
| 保質(zhì)期 | 六個月 |
| 適應物種 | 正常的生物樣本種屬 |
| 檢測限 | 可按要求定制 |
| 數(shù)量 | 999 |
| 包裝規(guī)格 | 96T/48T |
| 標記物 | HRP標記物 |
| 樣本 | 正常的生物樣本 |
| 應用 | 含量檢測 |
| 是否進口 | 否 |
本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷
河豚毒素（TTX）ELISA檢測試劑盒
使用說明書
檢測原理：試劑盒采用雙kàng體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被河豚毒素（TTX）單克隆kàng體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測kàng體，經(jīng)過溫育并chè底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的河豚毒素（TTX）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法：
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品：
1. 酶標儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項：
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶wán全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑盒組成：
| 名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 無 |
| 標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 檢測kàng體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
| 20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 無 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 無 |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
| 說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
| 自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |
注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、10、20、40、80、160 ppb
試劑的準備：
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法：
1. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步驟；
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測kàng體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷:
繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能:
1. 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值，大于等于0.9500。
2. 靈敏度：檢測范圍1-160 ppb，zuì低檢測濃度小于1.0ppb。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6個月
免責聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES. Tetradotoxin (TTX) ELISA Kit instruction Intended use This TTX ELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures. The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450 nm using a spectrophotometer. In order to measure the concentration of TTX in the sample, this TTX ELISA Kit includes a set of calibration standards. The calibration standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus TTX concentration. The concentration of TTX in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.
